基本信息
| 细胞名称： | MDA-MB-231，人乳腺癌细胞 | | 保存： | -20度 | 规格： | T25瓶或者2ml冻存管 | | 生长特性： | 贴壁生长 | 传代比例： | 细胞80-90%汇合时 1:2~1:4传代（建议） | | 培养条件： | 90% DMEM，10%胎牛血清（特） ，100U/ml双抗，37℃,5%CO2 | | 冻存条件： | 70%基础培养基+20%FBS+10%DMSO |
仅供科研使用，不可用于临床诊断和治疗 冻存细胞接收后的处理： 1）干冰运输，收到细胞后立即转入液氮或直接复苏； 2）收到细胞后，若发现干冰已经充分挥发、冻存管瓶盖破裂脱落,请立即拍照后与我们联系。 复苏细胞接收后的处理： 1）收到细胞后，请先检查培养瓶是否破损或漏液，培养液是否混浊，如有漏液及培养液混浊情况请立即拍照把图片发给我们。 2）75%酒精消毒瓶身后放培养箱中静置4-6h后，在显微镜下确认细胞状态并拍照100倍和200倍的照片，若有贴壁细胞脱落，可收集上清离心，将沉淀用新的培养基接种至新的培养瓶或培养皿中。 3）建议收到当天不要消化处理，如果细胞长满90%，可选择传代处理。 4）如您收到细胞3天内没有反馈相关问题，出现的细胞问题将不提供免费重发服务。 细胞培养方法： 1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代 ①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次； ②加入1ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化； ③细胞消化0.5-2min（具体时间根据镜下形态判断），显微镜下观察细胞，细胞回缩，即将脱壁而未脱壁时（可用枪轻轻吹打确认细胞是否脱壁），加入培养基终止消化（若消化过度可能会对细胞存活率产生较大影响）； ④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清； ⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基； ⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。 2、细胞复苏： ①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀； ②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入T25培养瓶或60mm培养皿中，补加适量培养基。 3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存 ①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化； ②细胞消化0.5-2min（具体时间根据镜下形态判断），显微镜下观察细胞，细胞回缩，即将脱壁而未脱壁时（可用枪轻轻吹打确认细胞是否脱壁），加入培养基终止消化（若消化过度可能会对细胞存活率产生较大影响）； ③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞； ④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。 原创作者：青岛捷世康生物科技有限公司 |
