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    细胞皮尔斯(PERLS-DAB)非血红素铁(三价)强化染色试剂盒产品说明书

    阅读次数:1426  发布时间:2023/10/13 15:17:46
     主要用途

     

    细胞皮尔斯PERLS-DAB非血红素铁(三价)强化染色试剂是一种旨在氰亚铁酸盐结合反应技术,进一步使用二氨基联苯胺的强化扩增,分析细胞样品中三价正铁离子(ferric ion)沉积现象的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良皮尔斯(Perls方法、成功实验证明的。主要适用于各种细胞样品中三价正铁离子检测。广泛用于各种神经细胞或组织病理生理的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,显色清晰。

    产品内容

    清理液(Reagent A 毫升

    固着液(Reagent B 毫升

    染色液(Reagent C 毫升

    酸性液(Reagent D 毫升

    封阻液(Reagent E 毫升

    显色液(Reagent F 毫升

    反应液(Reagent G 毫升

    产品说明书 1

    保存方式

    保存显色液(Reagent F)在-20冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;染色液(Reagent C)和显色液(Reagent F),避免光照;染色液(Reagent C)和酸性液(Reagent D)具有腐蚀性和毒性,注意操作安全;有效期 6

    用户自备

    2毫升离心管:用于染色工作液配制的容器

    小型染色缸:用于细胞染色操作

    光学显微镜:用于细胞染色后观察分析

     实验步骤

    操作一:细胞载玻片染色

     

    一、 样本固着处理

     

    1. 取出待测的细胞载玻片或细胞涂片  

    2. 小心加上xx微升清理液(Reagent A在载玻片上,铺满整个样品表面

    3. 小心移去载玻片上的清理液(Reagent A

    4. 小心加上xx微升固着液(Reagent B,铺满整个样品表面

    5. 室温下,孵育10分钟

    6. 小心移去载玻片上的固着液(Reagent B

    7. 小心加上xx微升清理液(Reagent A),清洗样品表面

    8. 小心移去载玻片上的清理液(Reagent A

    9. 重复实验步骤78一次

    二、样本染色处理

    操作开始,将4℃冰箱里的试剂盒中的染色液(Reagent C酸性液(Reagent D置入室温下,分别移出1毫升到2.2毫升离心管,混匀后,标记为染色工作液,用锡箔纸包裹,避免光照。然后进行下列操作。

    1. 小心加上xx微升染色工作液,铺满整个载玻片样品表面

    2. 室温下孵育30分钟;或直至可见篮色

    3. 小心移去载玻片上的染色工作液

    4. 室温下,小心将载玻片置入xx毫升清理液(Reagent A中孵育2分钟

    5. 小心移去载玻片上的清理液(Reagent A  

    三、样本显色处理

    实验开始,将-20冰箱里试剂盒中的色液(Reagent F置入冰槽里融化,然后移取xx微升色液(Reagent Fxx毫升反应液(Reagent G2.2毫升离心管,充分混匀,标记为色工作液,置于暗室。色液(Reagent F用完后即刻放回-20冰箱里。

     

    1. 小心加上xx微升封阻液(Reagent E在载玻片上,铺满整个载玻片样品表面

    2. 室温下孵育20分钟

    3. 小心移去载玻片上的封阻液(Reagent E

    4. 室温下,小心将载玻片置入xx毫升清理液(Reagent A中孵育2分钟

    5. 小心移去载玻片上的清理液(Reagent A(注意:须清洗干净,否则影响下一步操作)

    6. 小心加上xx微升显色液(Reagent F在载玻片上,铺满整个载玻片样品表面

    7. 室温下孵育20分钟,避免光照

    8. 小心移去载玻片上的显色液(Reagent F

    9. 小心加上xx微升显色工作在载玻片上,铺满整个载玻片样品表面

    10. 室温下孵育15分钟,或直至肉眼可见棕黑色沉积,避免光照

    11. 小心移去载玻片上的显色工作 

    12. 室温下,小心将载玻片置入xx毫升清理液(Reagent A中孵育2分钟

    13. 小心移去载玻片上的清理液(Reagent A

    14. 放上盖玻片或封片

    1. 小心抽去清理液(Reagent A

    2. 每孔加入xx微升清理液(Reagent A

    3. 即刻在一般光学显微镜下观察:三价铁沉积阳性细胞呈现棕褐

     

     

    注意事项

    1. 本产品为50次(细胞载玻片)和25次(124孔板)操作

    2. 操作时,须戴手套和防护面罩

    3. 建议在通风柜里操作

    4. 所有操作在室温下进行

    5. 染色液(Reagent C酸性液(Reagent D具有腐蚀性和毒性,注意操作安全

    6. 每次更换试剂溶液时,保持载玻片面基本晾干。空气中晾干状态为没有水滴,呈湿润状态,可见反光

    7. 试剂溶液在载玻片表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满载玻片表面

    8. 色液(Reagent F避免反复冻融

    9. 色工作液不能储存后使用;如果发现沉淀,不宜使用

    10. 样品染色避免过度,肉眼可见色即可终止染色

    11. 细胞染色完成后,即刻进行光学显微镜观察 

    12. 本公司提供系列组织细胞金属元素染色试剂产品

     

    质量标准

    1. 本产品经鉴定性能稳定

    2. 本产品经鉴定显色清晰

     

    原创作者:青岛捷世康生物科技有限公司


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