主要用途 细胞皮尔斯(PERLS-DAB)非血红素铁(三价)强化染色试剂是一种旨在氰亚铁酸盐结合反应技术,进一步使用二氨基联苯胺的强化扩增,分析细胞样品中三价正铁离子(ferric ion)沉积现象的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良皮尔斯(Perls)方法、成功实验证明的。主要适用于各种细胞样品中的三价正铁离子检测。广泛用于各种神经细胞或组织病理生理的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,显色清晰。
产品内容 清理液(Reagent A) 毫升 固着液(Reagent B) 毫升 染色液(Reagent C) 毫升 酸性液(Reagent D) 毫升 封阻液(Reagent E) 毫升 显色液(Reagent F) 毫升 反应液(Reagent G) 毫升 产品说明书 1份 保存方式 保存显色液(Reagent F)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;染色液(Reagent C)和显色液(Reagent F),避免光照;染色液(Reagent C)和酸性液(Reagent D)具有腐蚀性和毒性,注意操作安全;有效期 6月 用户自备 2毫升离心管:用于染色工作液配制的容器 小型染色缸:用于细胞染色操作 光学显微镜:用于细胞染色后观察分析 实验步骤 操作一:细胞载玻片染色 一、 样本固着处理 1. 取出待测的细胞载玻片或细胞涂片 2. 小心加上xx微升清理液(Reagent A)在载玻片上,铺满整个样品表面 3. 小心移去载玻片上的清理液(Reagent A) 4. 小心加上xx微升固着液(Reagent B),铺满整个样品表面 5. 室温下,孵育10分钟 6. 小心移去载玻片上的固着液(Reagent B) 7. 小心加上xx微升清理液(Reagent A),清洗样品表面 8. 小心移去载玻片上的清理液(Reagent A) 9. 重复实验步骤7至8一次 二、样本染色处理 操作开始,将4℃冰箱里的试剂盒中的染色液(Reagent C)和酸性液(Reagent D)置入室温下,分别移出1毫升到2.2毫升离心管,混匀后,标记为染色工作液,用锡箔纸包裹,避免光照。然后进行下列操作。 1. 小心加上xx微升染色工作液,铺满整个载玻片样品表面 2. 室温下孵育30分钟;或直至可见篮色 3. 小心移去载玻片上的染色工作液 4. 室温下,小心将载玻片置入xx毫升清理液(Reagent A)中孵育2分钟 5. 小心移去载玻片上的清理液(Reagent A) 三、样本显色处理 实验开始,将-20℃冰箱里试剂盒中的显色液(Reagent F)置入冰槽里融化,然后移取xx微升显色液(Reagent F)和xx毫升反应液(Reagent G)到2.2毫升离心管,充分混匀,标记为显色工作液,置于暗室。显色液(Reagent F)用完后即刻放回-20℃冰箱里。 1. 小心加上xx微升封阻液(Reagent E)在载玻片上,铺满整个载玻片样品表面 2. 室温下孵育20分钟 3. 小心移去载玻片上的封阻液(Reagent E) 4. 室温下,小心将载玻片置入xx毫升清理液(Reagent A)中孵育2分钟 5. 小心移去载玻片上的清理液(Reagent A)(注意:须清洗干净,否则影响下一步操作) 6. 小心加上xx微升显色液(Reagent F)在载玻片上,铺满整个载玻片样品表面 7. 室温下孵育20分钟,避免光照 8. 小心移去载玻片上的显色液(Reagent F) 9. 小心加上xx微升显色工作液在载玻片上,铺满整个载玻片样品表面 10. 室温下孵育15分钟,或直至肉眼可见棕黑色沉积,避免光照 11. 小心移去载玻片上的显色工作液 12. 室温下,小心将载玻片置入xx毫升清理液(Reagent A)中孵育2分钟 13. 小心移去载玻片上的清理液(Reagent A) 14. 放上盖玻片或封片
1. 小心抽去清理液(Reagent A) 2. 每孔加入xx微升清理液(Reagent A) 3. 即刻在一般光学显微镜下观察:三价铁沉积阳性细胞呈现棕褐色 注意事项 1. 本产品为50次(细胞载玻片)和25次(1个24孔板)操作 2. 操作时,须戴手套和防护面罩 3. 建议在通风柜里操作 4. 所有操作在室温下进行 5. 染色液(Reagent C)和酸性液(Reagent D)具有腐蚀性和毒性,注意操作安全 6. 每次更换试剂溶液时,保持载玻片面基本晾干。空气中晾干状态为没有水滴,呈湿润状态,可见反光 7. 试剂溶液在载玻片表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满载玻片表面 8. 显色液(Reagent F)避免反复冻融 9. 显色工作液不能储存后使用;如果发现沉淀,不宜使用 10. 样品染色避免过度,肉眼可见棕色即可终止染色 11. 细胞染色完成后,即刻进行光学显微镜观察 12. 本公司提供系列组织细胞金属元素染色试剂产品 质量标准 1. 本产品经鉴定性能稳定 2. 本产品经鉴定显色清晰 原创作者:青岛捷世康生物科技有限公司 |