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    种子生活力检测试剂盒(溴麝香草酚蓝BTB法)说明书

    阅读次数:698  发布时间:2023/12/18 15:41:59
     产品简介:

    种子生活力是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力,其高低决定了种子品质和实用价值大小,关系到播种时的用种量,测定种子生活力常用方法为发芽实验法,即在适宜条件下让种子吸水萌发,在规定天数内统计发芽的种子占供试种子数的百分比,但是常规发芽实验法需时较长,无法用于应急需要,也无法检测休眠种子的生活力,常用比较快速的检测方法有氯化三苯基四氮唑(TTC)法、溴麝香草酚蓝(BTB)法、红墨水染色法和荧光法等。

    具有生活力的种胚有呼吸作用,吸收空气中氧气放出二氧化碳,二氧化碳溶于水生成碳酸,又解离出氢离子和碳酸氢根,使得种胚周围环境的酸度增加,因此可以用溴麝香草酚蓝(BTB)来定性测定酸度的改变,BTB的变色范围为pH6.0~7.6,在酸性介质中呈黄色,在碱性介质中呈蓝色,中间色为绿色(变色点为7.1),因此可根据BTB颜色差异来判断种子的生活力;本方法有以下优点:快速、准确;颜色变化明显,易于观察。该试剂盒仅用于科研域,不适用于临床诊断或其他用途。

    自备材料:

    1 材料:小麦、绿豆、水稻、油菜、花生、玉米等植物种子

    2、 恒温箱

    3、 培养箱

    4、 培养皿

    操作步骤(仅供参考)

    1浸种:将待测种子用 30℃温水浸泡2~6h,使种子充分吸胀。

    2、配制BTB琼脂凝胶:取适量的BTB指示剂和琼脂粉,按BTB指示剂:琼脂粉=10ml

    0.15g 的比例混合,用恒温箱或微波炉加热助溶,待琼脂粉溶解后,趁热倒在干净的培养皿即为BTB琼脂凝胶,厚度以能浸没种子为宜,冷却后备用。

    3、随机取100粒吸胀种子,种胚朝下,整齐地埋于BTB琼脂凝胶中,间距至少1cm

    4、将培养皿置于 30~35℃恒温箱中培养 1~4h

    5、在蓝色或绿色背景下观察,种胚附近呈现较深黄色晕圈的是活种子,否则是死种子。

    6、可以用在沸水中浸泡处理的种子进行对照观察。

    计算:

    观察统计 100 粒种子,计算有活力种子的百分数。

    其公式为: 种子生活力百分数(%)=活种子粒数/100×100%

     

    注意事项:

    1 BTB凝胶厚度取决于种子的大小,原则上需种胚接触培养皿底部后尚有部分露出凝胶上方,凝胶厚度应使种子稳定其中。

    2、 种子需完好无损,不能有破种子或霉变种子。

    3BTB指示剂应为绿色或蓝色溶液,pH7.1~8.5较适宜,如变为黄色或黄绿色,说明pH 降低,可滴加少量稀氨水或者氢氧化钠等碱性试剂调整后即可正常使用。pH值较高也不利于观察颜色的变化。

    4、 培养温度一般以30~35℃为宜。

     

    有效期12个月有效。 

    原创作者:青岛捷世康生物科技有限公司


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