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    总胆固醇(TC)检测试剂盒(邻苯二甲醛比色法)说明书

    阅读次数:696  发布时间:2024/1/30 16:06:46
     

    产品简介:

    胆固醇(Cholesterol)又称胆甾醇,是一种环戊烷多氢菲的衍生物,分子式 C27H46O, 分子量为 3860.65,胆固醇广泛存在于动物体内,其中脑、神经组织丰富,在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也较高。

    总胆固醇(TC)检测试剂盒(邻苯二甲醛比色法)检测原理是胆固醇及其脂在强酸存在下与邻苯二甲醛反应,产生紫红色化合物,该化合物在 550nm 波长处有吸收峰, 分光光度计在 550nm 处进行比色测定,胆固醇含量在 4mg/ml 之内与吸光度呈良好线性关系;本试剂盒用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的总胆固醇含量定量测定,其优点是:1、操作简便;2、灵敏;3、稳定;4、无需将胆固醇单独抽提出来或去除样品中的蛋白质。该试剂盒仅用于科研域,不适用于临床诊断或其他用途。

    自备材料:

    1、蒸馏水、浓硫酸、生理盐水或 PBS

    2、试管或离心管、分光光度计、比色皿

    操作步骤(仅供参考)

    1、样本处理:

    ①血清、血浆、脑脊液样本:从待测样本中分离出的血清或血浆不应有溶血,直接检测,    如超过线性范围,用生理盐水稀释后检测。

    ②细胞样本:

    a.取适量的细胞(一般推荐>106 以上),1000g 离心 10min,弃上清,留取沉淀。b.用 PBS 或生理盐水清洗 1~2 次,1000g 离心 10min,弃上清,留取沉淀。

    c.加入 200~300μl 的 PBS 或生理盐水匀浆,冰浴条件下超声破碎细胞,功率 300W, 每次 3~5s,间隔 30s,重复 3~5 次;亦可手动匀浆,制备好的匀浆液不可离心;亦可 1~2% Triton X-100 冰浴 30~60min,制备好的裂解液不可离心。

    ③组织样本:准确称取适量组织样本,按质量(g):生理盐水=1:4 的比例,加入生理盐水,冰浴条件下手动或机械匀浆,2500~3000g 离心 10min,取上清待用。

    6、胆固醇测定:充分混匀, 静置 10min,1cm 比色杯,以分光光度计测定 550m 吸光度, 以空白管调零,读取标准管和各待测管的吸光度。

    计算:以系列胆固醇浓度(0~4 号)为横坐标,以对应的吸光度为纵坐标,作标准曲线,以测定管的吸光度照标准曲线,求出待测样本的浓度。

    注意事项:

    1、 上述低温试剂避免反复冻融,以免失效或效率下降。

    2、 本法可直接用于检测脑脊液中的 TC 含量,也可直接检测尿液中的 TC 含量。

    3、 待测样本如不能及时测定,应置于 2~8℃保存,3 天内稳定。

    4 如果样本 TC 浓度过高,结果可能呈假性降低,应用生理盐水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。

    5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    6、 试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。

    有效期:6 个月有效;常温运输,按要求保存。

    原创作者:青岛捷世康生物科技有限公司


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